POD反应液什么? pod反应混合液如何配?
原标题:POD反应液什么? pod反应混合液如何配?
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pod反应液放多久POD反应液放多久,一般情况下不超过48小时。POD反应液是一种检测水溶性有机物的方法,它能够检测有机物的含量,从而确定污染物的...
Pod反应液放多久
pod反应液放多久,一般情况下不超过48小时。POD反应液是一种检测水溶性有机物的方法,它能够检测有机物的含量,从而确定污染物的存在。在使用POD反应液测定有机物含量时,要求反应液与样品必须在一定的温度下存放一段时间,以便有机物与反应液完全混合。
但在终点法中,延长孵育时间足以完成变旋过程。新配制的葡萄糖标准液主要是α型,因此需放置2小时以上(最好过夜),以达到变旋平衡后方可应用。葡萄糖氧化酶法适用于脑脊液葡萄糖含量的直接测定,但不能直接测定尿液葡萄糖含量,因为尿液中尿酸等干扰物质浓度高会干扰过氧化物酶反应,导致结果偏低。
B. POD溶液制备:在50mL 100mmol/L pH0的磷酸盐缓冲液中加入19uL愈创木酚,加热搅拌,溶解冷却后加入28uL 30%的H2O2即为POD反应液,放到冰箱保存。
酶酚混合试剂的制备是将酶试剂与酚溶液等量混合,于4℃下可存放1个月。12mmol/L苯甲酸溶液的制备是将4g苯甲酸溶解于约800ml蒸馏水中,加热助溶后冷却至室温,再加蒸馏水定容至1 L。
含2%的聚乙烯吡咯烷酮),研磨,4℃ 8000 r/min离心20 min,上清液定容至5 ml。 POD活性测定按Kraus和Fletcher(1994)方法进行3 ml反应混合液中含0.2%愈创木酚0.95 ml,50 mmol L-1 PBS(pH0)1 ml,酶液0.05 ml,0.3%过氧化氢1 ml。记录1 min内470 nm下的光吸收值变化。
pod酶活性测定方法
pod酶活性测定方法有定时法、连续监测法、平衡法。定时法 通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或物的变化。优点:简单易行,对试剂要求不高。
pod活性是测得出来的。pod,即过氧化物酶,它的活性测定方法是:称取1g鲜样,加0.1mol/LTris-HCl磷酸缓冲液,1300g、4℃下离心20min,采用分光光度法测定上清液中的酶活性。
植物体内过氧化物酶(POD)活性的测定通常采用光度法或荧光法。光度法:将植物组织或提取物加入含有过氧化氢和双甲基苯酚的反应液中,过氧化物酶催化过氧化氢分解产生的游离基与双甲基苯酚发生氧化反应,生成苯醌衍生物,产生黄色或棕色的化合物。可以通过测定反应液的吸光度或比色板的读数来测定POD活性。
POD测定:酶液稀释10倍,取50uL待测液与2mL POD反应液和1mL 0.2mo1/L的磷酸二氢钾溶液反应,用紫外分光光度计于470nm处每隔30sec测其吸光值A470,重复3次求平均值,以△A470/min/gFW表示酶活大小。SOD(超氧化物歧化酶活性)的测定 试剂:① 0.05mol/l磷酸缓冲液(PH值为8)。
测定过氧化物酶活性使用愈创木酚法,原理是在酶的催化下,H2O2aq与愈创木酚反应生成茶褐色产物。此产物在470nm波长下具有最大吸收值,通过紫外分光光度计测定吸光度,反推酶活性。实验每分钟读一次吸光度,因为酶促反应持续进行,产物生成导致吸光度变化。
.5 g叶片加入50 mmol L-1磷酸缓冲液(pH8,含2%的聚乙烯吡咯烷酮),研磨,4℃ 8000 r/min离心20 min,上清液定容至5 ml。
植物体内过氧化物酶活性的测定
植物体内过氧化物酶(POD)活性的测定通常采用光度法或荧光法。光度法:将植物组织或提取物加入含有过氧化氢和双甲基苯酚的反应液中,过氧化物酶催化过氧化氢分解产生的游离基与双甲基苯酚发生氧化反应,生成苯醌衍生物,产生黄色或棕色的化合物。可以通过测定反应液的吸光度或比色板的读数来测定POD活性。
植物组织中过氧化物酶活性测定通常采用光度法或荧光法。在植物组织中测定过氧化物酶活力时,反应液需要预冷,以防止酶的活性受到温度的影响而降低。通常会使用冷冻离心机冷却反应液,并在试验过程中保持反应液温度低于室温的情况下进行测定。
活性测定: 取一定量的样本匀浆加入到氢过氧化物溶液中,开始反应。过氧化物酶将氢过氧化物分解为水和氧气。气泡产生的速率与过氧化物酶活性成正比。活性停止: 在反应一定时间后,加入过氧化氢酶停酶溶液,停止过氧化物酶的活性,使气泡停止产生。气体收集: 使用气体收集装置将产生的氧气收集起来。
植物过氧化物酶活性测定实验中酶活性降低的原因是:氧气浓度过低,在植物过氧化物酶活性测定实验中氧气低于普通水平,所以导致酶活性降低。温度过低,酶活性是与温度有密切联系的,温度越低活性越差。以上就是植物过氧化物酶活性测定实验中酶活性降低的原因。
准确的说是愈创木酚 愈创木酚法测定活性酶定操作 实验目的 过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶,它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系,在植物生长发育过程中,它的活性不断发生变化,因此测量这种酶,可以反映某一时期植物体内代谢的变化。
pod测定方法
1、pod酶活性测定方法有定时法、连续监测法、平衡法。定时法 通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或物的变化。优点:简单易行,对试剂要求不高。
2、.5 g叶片加入50 mmol L-1磷酸缓冲液(pH8,含2%的聚乙烯吡咯烷酮),研磨,4℃ 8000 r/min离心20 min,上清液定容至5 ml。
3、POD测定:酶液稀释10倍,取50uL待测液与2mL POD反应液和1mL 0.2mo1/L的磷酸二氢钾溶液反应,用紫外分光光度计于470nm处每隔30sec测其吸光值A470,重复3次求平均值,以△A470/min/gFW表示酶活大小。SOD(超氧化物歧化酶活性)的测定 试剂:① 0.05mol/l磷酸缓冲液(PH值为8)。
葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度是什么实验类型
1、葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖的实验原理在于,葡萄糖氧化酶(GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并释放出过氧化氢(H2O2)。
2、干化学葡萄糖氧化酶法:特异强、价廉、方法简单,是目前国内首选的测定血糖方法。其正常值:空腹全血为5-3毫摩尔/升(55-95毫克/分升),血浆为9-1毫摩尔/升(70-110毫克/分升)。
3、葡萄糖氧化酶法 原理:葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化反应中释放过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下与色原性氧受体缩合为红色化合物,此物质在505mm处有最大吸收峰,其吸光度值和葡萄糖量成正比。
4、葡萄糖脱氢酶电极测量法PQQ-Glucos dehydrogenase原理:通过测量血液中的葡萄糖与试纸中的葡萄糖脱氢酶反应产生的电流量测量血糖。主要有罗氏优越型、利舒坦、欧姆龙215型。优点:除氧化酶的优点之外,由于空气中含氢气较少的原因,他还克服了氧化酶不易保存的缺点,一般开罐后可用到效期结束。
5、葡萄糖氧化酶法是一种测量血糖的方法,血糖也称作血液中的葡萄糖。此法是将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,同时产生过氧化氢,最终形成一种红色醌类化合物,红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
gop-pod法试剂
1、本文介绍了一套用于生化分析的gop-pod法试剂的配制方法。gop-pod法是葡萄糖氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林-酚类试剂(GOD-PHOS)反应,用于快速检测葡萄糖含量。
2、本法操作中应直接将标本加至试剂中,并通过吸试剂反复冲洗吸管,确保结果的可靠性。对严重黄疸、溶血及乳糜样血清样本,应先制备无蛋白血滤液,然后再进行测定。葡萄糖氧化酶法的线性范围广,回收率高,批内CV低,批间和日间CV控制在合理范围内。
3、故测定结果与同位素稀释-气相色谱质谱法(决定性方法)接近。甘油三酯酶法(COD-PAP法)原理:用脂蛋白酯酶(LPL)使血清中三酰甘油(TG)水溶解成甘油与脂肪酸,将生成的甘油用甘油激酶(GK)及三磷酸腺苷(ATP)磷酸化。