pod酶活性测定实验注意事项，pod酶活性测定方法

Pod活性测不出来

pod活性是测得出来的。POD，即过氧化物酶，它的活性测定方法是：称取1g鲜样，加0.1mol/LTris-HCl磷酸缓冲液，1300g、4℃下离心20min，采用分光光度法测定上清液中的酶活性。

pod酶活性测定方法有定时法、连续监测法、平衡法。定时法 通过测定酶反应开始后某一时间段内（t1到t2）产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或物的变化。优点：简单易行，对试剂要求不高。

待测样品中不能含有酶抑制剂，同时需避免反复冻融。 POD酶液提取时，注意低温操作，防止酶活性。 以煮沸的酶液为对照时，酶要充分失活。 POD氧化剂具有一定腐蚀性，请小心操作。 POD氧化剂易挥发，请密闭保存，否则检测效率下降。

POD是一种重要的生物酶，能够催化过氧化物分解，从而保护细胞免受过氧化物的损害。在POD的活性测定实验中，通常会通过测量样品在不同时间点的吸光度变化来评估POD的活性。△A470表示在470nm波长处的吸光度变化。由于不同浓度的POD溶液在不同时间点的吸光度不同，因此通过测量△A470可以计算出POD的活性。

测量的这段期间内，如果反应速度放缓或下降，测定结果就会不准确。实验应严格控制时间，确保计时精确，动作迅速，以保证实验结果准确性。提取酶液时，离心量应准确，反应系统酶液量要精确。提取粗酶液应在低温条件下进行，采用冰浴研磨，离心时低温下进行，尽量避免温度对酶活性的影响。

可以通过测定反应液的吸光度或比色板的读数来测定POD活性。荧光法：将植物组织或提取物加入含有过氧化氢和荧光素的反应液中，过氧化物酶催化过氧化氢分解产生的游离基与荧光素发生氧化反应，产生一种高荧光产物，可以通过荧光光度计测定荧光强度来测定POD活性。

植物组织pod活性的测定注意事项

待测样品中不能含有酶抑制剂，同时需避免反复冻融。 POD酶液提取时，注意低温操作，防止酶活性。 以煮沸的酶液为对照时，酶要充分失活。 POD氧化剂具有一定腐蚀性，请小心操作。 POD氧化剂易挥发，请密闭保存，否则检测效率下降。

植物体内过氧化物酶（POD）活性的测定通常采用光度法或荧光法。光度法：将植物组织或提取物加入含有过氧化氢和双甲基苯酚的反应液中，过氧化物酶催化过氧化氢分解产生的游离基与双甲基苯酚发生氧化反应，生成苯醌衍生物，产生黄色或棕色的化合物。可以通过测定反应液的吸光度或比色板的读数来测定POD活性。

植物POD活性的正常范围是440.327~52463U/g。这个范围是通过对大量植物样品的测量得出的平均值和标准差。POD活性的单位是U/g，表示每克植物组织中的过氧化物酶活性。POD活性的测量通过酶学方法进行，常用的是测定POD催化反应产生的染色产物的吸光度变化。这种测量方法可以反映出植物体内POD的活性水平。

在植物生长发育的不同阶段，过氧化物酶的活性会呈现出动态变化。通常情况下，老化组织中过氧化物酶的活性相对较高，而幼嫩组织中的活性则较弱。这是因为过氧化物酶能够促使组织中的特定碳水化合物转化成木质素，进而增加组织的木质化程度。

植物生理学POD是：过氧化物酶体的标志酶，是其一类氧化还原酶，它们能催化很多反应。了解过氧化氢酶活性测定的几种方法，掌握用愈创木酚法分别测定过氧化氢酶和过氧化物酶的活性。过氧化物酶广泛颁布于植物的各个组织器官中。

pod酶活性测定方法

1、pod酶活性测定方法有定时法、连续监测法、平衡法。定时法 通过测定酶反应开始后某一时间段内（t1到t2）产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或物的变化。优点：简单易行，对试剂要求不高。

2、pod活性是测得出来的。pod，即过氧化物酶，它的活性测定方法是：称取1g鲜样，加0.1mol/LTris-HCl磷酸缓冲液，1300g、4℃下离心20min，采用分光光度法测定上清液中的酶活性。

3、POD测定：酶液稀释10倍，取50uL待测液与2mL POD反应液和1mL 0.2mo1/L的磷酸二氢钾溶液反应，用紫外分光光度计于470nm处每隔30sec测其吸光值A470，重复3次求平均值，以△A470/min/gFW表示酶活大小。SOD（超氧化物歧化酶活性）的测定 试剂：① 0.05mol/l磷酸缓冲液（PH值为8）。