pod吸光度怎么算（吸光度值od）

果蔬中过氧化物酶活性的测定

实验所需材料包括各种果蔬，以及研磨设备、离心机、分光光度计等仪器，以及醋酸缓冲液、愈创木酚、H2O2等试剂。具体制备过程中，需先制备酶液，通过研磨果蔬并离心提取酶提取液，然后进行活性测定，通过在特定波长下测定吸光度变化，计算出每分钟吸光度变化值，以此确定过氧化物酶的活性。

果蔬中过氧化物酶活性的测定主要通过愈创木酚法进行。具体方法和注意事项如下：测定方法： 原理：过氧化物酶催化H2O2氧化酚类物质，产生有色化合物。在愈创木酚法中，Pod催化H2O2将愈创木酚氧化为红棕色的4邻甲氧基苯酚，该物质在470 nm处有高光吸收，因此可利用比色法测量其活性。

在测定过氧化氢酶活力时，我们通常会测量反应溶液在特定波长下的吸光度值。随着过氧化氢酶的活性增加，反应溶液的吸光度会随时间而降低。根据吸光度的变化，可以计算出过氧化氢酶的活性单位，通常以每克鲜重（FW）果蔬样品每分钟吸光度变化值增加1时为1个过氧化物酶活性单位（U）。

过氧化物酶属于最耐热的酶类，在果蔬加工中常被当作热处理是否充分的指标。

检验酶的活性。烫漂时间一般以过氧化氢酶和过氧化物酶恰好失活为标准来确定烫漂的时间。

保持果蔬原有的色、香、味。测定过氧化氢酶活力对果蔬加工可以保持食品原有色、香、味，过氧化氢酶还可防止果蔬冷冻保藏时的发酵变质以达到保鲜效果。过氧化氢酶是催化过氧化氢分解成氧和水的酶，存在于细胞的过氧化物酶体内。

计算pod活性时△470什么意思

1、在波长为470nm处的变化。在计算POD活性时，△470指的是在波长为470nm处的吸光度变化。pod是一种生物酶，能够催化过氧化物分解，从而保护细胞免受过氧化物的损害。通过测量样品在不同时间点的吸光度变化，可以评估pod的活性。

2、样品在波长为470纳米处的吸光度变化。POD是一种常用的生物活性指标，是反映细胞受到氧化损伤的程度，德尔塔470是通过比较样品和空白对照组的吸光度来计算得出的数据，因此，计算pod活性时德尔塔470是样品在波长为470纳米处的吸光度变化。

3、测定过氧化物酶活性使用愈创木酚法，原理是在酶的催化下，H2O2aq与愈创木酚反应生成茶褐色产物。此产物在470nm波长下具有最大吸收值，通过紫外分光光度计测定吸光度，反推酶活性。实验每分钟读一次吸光度，因为酶促反应持续进行，产物生成导致吸光度变化。

4、POD测定：酶液稀释10倍，取50uL待测液与2mL POD反应液和1mL 0.2mo1/L的磷酸二氢钾溶液反应，用紫外分光光度计于470nm处每隔30sec测其吸光值A470，重复3次求平均值，以△A470/min/gFW表示酶活大小。SOD（超氧化物歧化酶活性）的测定 试剂：① 0.05mol/l磷酸缓冲液（PH值为8）。

5、过氧化物酶催化H2O2氧化酚类物质，产生有色化合物。在愈创木酚法中，POD催化H2O2将愈创木酚氧化为红棕色的4-邻甲氧基苯酚，其470 nm处有高光吸收，因此可利用比色法测量其活性。实验所需材料包括各种果蔬，以及研磨设备、离心机、分光光度计等仪器，以及醋酸缓冲液、愈创木酚、H2O2等试剂。

6、反应体系包括30μL粗酶液、290 L 0.3%愈创木酚（50 mmol/L的PBS配制，pH 4）和 80L0.3%H2O2（50 mmol/L的PBS配制，pH 4）。反应从加入H2O2后开始准确计时，连续吸光度在470 nm的上升值。POD活性以每分钟上升0.01为一个单位，结果以U/mg蛋白或U/g鲜重表示。

在测定pod活性的时候,要求反应时间内吸光度的变化,为什么

1、测定过氧化物酶活性使用愈创木酚法，原理是在酶的催化下，H2O2aq与愈创木酚反应生成茶褐色产物。此产物在470nm波长下具有最大吸收值，通过紫外分光光度计测定吸光度，反推酶活性。实验每分钟读一次吸光度，因为酶促反应持续进行，产物生成导致吸光度变化。

2、pod酶活性测定方法有定时法、连续监测法、平衡法。定时法 通过测定酶反应开始后某一时间段内（t1到t2）产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或物的变化。优点：简单易行，对试剂要求不高。

3、过氧化物酶催化H2O2氧化酚类物质，产生有色化合物。在愈创木酚法中，POD催化H2O2将愈创木酚氧化为红棕色的4-邻甲氧基苯酚，其470 nm处有高光吸收，因此可利用比色法测量其活性。实验所需材料包括各种果蔬，以及研磨设备、离心机、分光光度计等仪器，以及醋酸缓冲液、愈创木酚、H2O2等试剂。

4、L反应液（用50mmol/L，pH4的PBS配制，内含100mol/L邻苯二酚）中加入50 L的粗酶液，平衡1分钟后连续测定398nm吸光度的变化。以1分钟内398nm吸光度上升0.01为一个酶活性单位，结果以U/mg蛋白或U/g鲜重表示。

5、在过氧化物酶（POD）催化下，H2O2将愈创木酚氧化成茶褐色产物。此产物在470 nm处有最大光吸收值，故可通过测470 nm下的吸光度变化测定过氧化物酶的活性。 设备与试剂 分光光度计，TDL-5000B型低速冷冻多管离心机（R=18cm），研钵，容量瓶，量筒，试管，吸管。